【作者】 宋玮; 王伟; 王雨; 窦丽阳; 陈连凤; 严晓伟;
【Author】 SONG Wei,WANG Wei,WANG Yu,DOU Li-Yang,CHEN Lian-Feng,and YAN Xiao-Wei(Department of Cardiology,Peking Union Medical College Hospital,Beijing 100730,China)
【机构】 北京协和医院心内科;
【摘要】 目的利用荧光标记的胆固醇(NBD-胆固醇)建立测定人巨噬细胞胆固醇外流的新方法,并与传统同位素标记胆固醇的测定方法进行比较。方法提取受试者外周血单核细胞分化为人巨噬细胞。体外培养人单核细胞系THP-1及鼠单核细胞系J774。以不同浓度的NBD-胆固醇孵育THP-1细胞,观察胆固醇浓度和孵育时间对细胞摄取的影响。用荧光酶标仪测定荧光信号强度以反映胆固醇摄取和外流。分别在三种细胞中测量NBD-胆固醇外流率,并在原代人巨噬细胞中观察与同位素标记胆固醇外流率的相关性。结果 NBD-胆固醇孵育细胞后迅速分布于细胞器中,但不进入细胞核。细胞对NBD-胆固醇的摄取有浓度依赖性,但达峰时间不受浓度影响。NBD-胆固醇外流率在各种巨噬细胞中呈现相似趋势,由载脂蛋白A1和高密度脂蛋白诱导的外流率在诱导外流4 h达到平台期。3H-胆固醇外流率在人巨噬细胞中与NBD-胆固醇外流率显著相关(r=0.968,P<0.001)。结论 NBD-胆固醇是一种有效的、敏感且环保的探针,可替代同位素标记的胆固醇用于巨噬细胞外流率的测定。 更多还原
【Abstract】 Aim In this study,fluorescence labeled cholesterol(NBD-cholesterol) was used to establish a new method to evaluate the cholesterol efflux,and compared NBD-cholesterol with 3H-cholesterol in assay of cholesterol efflux. Methods Isolated human peripheral blood monocyte cells from volunteers were differentiated into human macrophages.Human monocyte line THP-1 and mouse monocyte line J774 cells were cultured in vitro.THP-1 macrophages were incubated with different concentrations of NBD-cholesterol t... 更多还原 【关键词】 胆固醇外流; 巨噬细胞; 荧光标记的胆固醇; 高密度脂蛋白; 载脂蛋白A1; 【Key words】 Cholesterol Efflux; Macrophages; NBD-cholesterol; High Density Lipoprotein; Apolipoprotein A1;
【分类号】R543.5
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