细胞与分子免疫学杂志 , Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology,
编辑部邮箱 , 2011年10期
 【作者】 魏培； 孙万邦； 黄俊琼； 曹雪梅； 罗军敏； 郑静； 王胜香； 宋明英；

【机构】 遵义医学院珠海校区,贵州省免疫学研究生教育创新基地；

【摘要】 目的:高效表达重组hIL-31制备IL-31抗体,探讨IL-31抗体拮抗皮肤炎症的作用,为研发IL-31抗体治疗性新药奠定基础。方法:①培养工程菌、IPTG诱导、菌体、超声破碎,用镍NTA柱纯化重组蛋白。②重组hIL-31蛋白溶液加佐剂免疫家兔,制备兔抗IL-31多克隆抗体。③将IL-31抗体分为3个剂量,经皮下注射和皮肤直接涂抹的途径,对已经致皮肤炎症的BALB/c小鼠治疗7d,治疗后3d取治疗部位皮肤作石蜡切片进行HE染色观察组织学变化,并检测血清中IL-6、IL-8、L选择素和MIP-3β等细胞因子的变化。结果:①SDS-PAGE电泳证实获得了高纯度的纯化人IL-31蛋白。②用重组hIL-31蛋白疫苗免疫家兔,在免疫后4周抗体滴度达到高峰,经ELISA法测血清抗体滴度为1∶15000～1∶20000,双扩滴度为1∶16。Western blot结果重组IL-31蛋白能与抗IL-31抗体特异性结合。③小鼠皮肤组织切片HE染色显示,治疗组皮下和皮内均有炎症细胞浸润,呈现剂量依赖性趋势。④血清中炎性因子ELISA检测,涂抹组和注射组小鼠血清中IL-6、IL-8、MIP-3β均明显低于阴... 更多还原

【关键词】 IL-31； 抗体； 拮抗； 皮肤炎症；
【基金】 贵州省优秀人才省长基金资助项目(黔科教办200607);贵州省社会发展攻关课题黔科合资助项目(20063039)【分类号】R392.1

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