中国动脉硬化杂志 , Chinese Journal of Arteriosclerosis, 编辑部邮箱 , 2011年12期 【作者】 吴洁; 邹瑾; 钟敏;
【Author】 WU Jie,ZOU Jin,and ZHONG Min (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,University of South China,Hengyang,Hunan 421001,China)
【机构】 南华大学附属第一医院心内科;
【摘要】 目的观察RNA干扰技术沉默脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因后,脂肪细胞甘油三酯合成及内脂素分泌的变化。方法将3T3-L1前脂肪细胞采用体外诱导分化为脂肪细胞,将脂肪细胞与0~1 mmol/L不同浓度脂肪酸共孵育后,测定其甘油三酯及内脂素的浓度。构建针对脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因的微小RNA质粒表达载体,将上述载体转染3T3-L1脂肪细胞,用逆转录聚合酶链反应和Western blot检测脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因及蛋白的表达,将0.5 mmol/L脂肪酸与沉默前后的脂肪细胞共孵育24 h,用逆转录聚合酶链反应检测脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因沉默前后脂肪细胞内脂素mRNA表达的变化,并测定其甘油三酯及内脂素浓度的变化。结果随着脂肪酸浓度的增高,与其共孵育的脂肪细胞内甘油三酯浓度也随着增加(P<0.05),其分泌的内脂素浓度也随着增加(P<0.05);构建脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白微小RNA质粒载体,转染脂肪细胞后,能显著抑制脂肪细胞内脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05);沉默脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因后脂肪细胞内甘油三酯浓度明显低于沉默前(P... 更多还原
【Abstract】 Aim To explore the influence of adipocyte’s triglyceride anabolism and visfatin secretion after silence adipocyte fatty acid binding protein(A-FABP) genes by RNA interference. Methods 3T3-L1 preadipocytes were cultured in vitro and were induced to differentiate into adipocytes,then the adipocytes were cultured with concentration from 0 to 1 mmol/L fatty acid,adipocyte’s triglyceride production and visfatin secretion were measured.The micro RNA(miRNA) expression vector plasmid about A-FABP genes ... 更多还原 【关键词】 脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白; RNA干扰技术; 甘油三酯; 内脂素; 【Key words】 Adipocyte Fatty Acid Binding Protein; RNA Interference; Triglyceride; Visfatin; 【基金】 衡阳市科技局科研项目(2009KJ64)【分类号】R543.5 中国动脉硬化杂志 , Chinese Journal of Arteriosclerosis, 编辑部邮箱 , 2011年12期 【作者】 吴洁; 邹瑾; 钟敏;
【Author】 WU Jie,ZOU Jin,and ZHONG Min (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,University of South China,Hengyang,Hunan 421001,China)
【机构】 南华大学附属第一医院心内科;
【摘要】 目的观察RNA干扰技术沉默脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因后,脂肪细胞甘油三酯合成及内脂素分泌的变化。方法将3T3-L1前脂肪细胞采用体外诱导分化为脂肪细胞,将脂肪细胞与0~1 mmol/L不同浓度脂肪酸共孵育后,测定其甘油三酯及内脂素的浓度。构建针对脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因的微小RNA质粒表达载体,将上述载体转染3T3-L1脂肪细胞,用逆转录聚合酶链反应和Western blot检测脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因及蛋白的表达,将0.5 mmol/L脂肪酸与沉默前后的脂肪细胞共孵育24 h,用逆转录聚合酶链反应检测脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因沉默前后脂肪细胞内脂素mRNA表达的变化,并测定其甘油三酯及内脂素浓度的变化。结果随着脂肪酸浓度的增高,与其共孵育的脂肪细胞内甘油三酯浓度也随着增加(P<0.05),其分泌的内脂素浓度也随着增加(P<0.05);构建脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白微小RNA质粒载体,转染脂肪细胞后,能显著抑制脂肪细胞内脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05);沉默脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因后脂肪细胞内甘油三酯浓度明显低于沉默前(P... 更多还原
【Abstract】 Aim To explore the influence of adipocyte’s triglyceride anabolism and visfatin secretion after silence adipocyte fatty acid binding protein(A-FABP) genes by RNA interference. Methods 3T3-L1 preadipocytes were cultured in vitro and were induced to differentiate into adipocytes,then the adipocytes were cultured with concentration from 0 to 1 mmol/L fatty acid,adipocyte’s triglyceride production and visfatin secretion were measured.The micro RNA(miRNA) expression vector plasmid about A-FABP genes ... 更多还原 【关键词】 脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白; RNA干扰技术; 甘油三酯; 内脂素; 【Key words】 Adipocyte Fatty Acid Binding Protein; RNA Interference; Triglyceride; Visfatin; 【基金】 衡阳市科技局科研项目(2009KJ64)【分类号】R543.5
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