张　婷/陈　倩/汤树生/靳　溪/邹家杰/刘凤英/张　  /肖希龙

(中国农业大学动物医学院药理和毒理教研室， 北京 100193)

Olaquindox weakened the antioxidant system in human hepatoma G2 cells

ZHANG Ting, CHEN Qian, TANG Shu_sheng, JIN Xi, ZOU Jia_jie, LIU Feng_ying, ZHANG Shen, XIAO Xi_long

(Department of Pharmacology and Toxicology, College of Veterinary Medicine, China Agriculture University, Beijing 100193, China)

　　【摘要】 目的： 观察喹乙醇对人肝癌细胞(HepG2)抗氧化系统的影响，探讨喹乙醇诱导HepG2细胞氧化性损伤的机制。 方法： 分别将0、200、400、800 μg/ml的喹乙醇作用于HepG2细胞24 h后，检测各组细胞内抗氧化酶/物的变化；另设800 μg/ml的喹乙醇作用于HepG2细胞3 h后，再用超氧化物歧化酶(SOD)(100 μg/ml)、过氧化氢酶(CAT)(100 μg/ml)及 SOD(100 μg/ml)＋CAT(100 μg/ml)分别作用细胞3 h的各实验组，采用分子探针2’,7’_二氯荧光黄双乙酸盐(2,7_dichlorodihydrofluorescein diacetate, DCFDA)检测各组处理后细胞内活性氧含量的变化。 结果： 不同浓度的喹乙醇作用HepG2细胞24 h后，细胞总ATPase、Na＋K＋－ATPase 及 Ca2＋Mg2＋－ATPase 和细胞内SOD、谷胱甘肽(GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH_PX)活性随喹乙醇浓度的升高而下降(P<0.05或P<0.01)，且具有一定的剂量_效应关系，细胞内CAT活性较对照组下降(P<0.01)，但无剂量_效应关系，而细胞内丙二醛(MDA)水平随喹乙醇浓度的升高而增加(P<0.05或P<0.01)，且呈一定的剂量_效应关系。经喹乙醇(800 μg/ml)处理细胞后，再分别用CAT、SOD 及 SOD＋CAT处理的各组，其ROS含量与单纯喹乙醇(800 μg/ml)组相比分别减少80％(P<0.01)、40％及95％(P<0.01)。 结论： 喹乙醇可使体外培养HepG2细胞的抗氧化系统受到一定的破坏，且产生的ROS形式以H2O2为主。

　　【关键词】 喹乙醇； 超氧化物歧化酶； 过氧化氢酶； 谷胱甘肽； 三磷酸腺苷酶； 活性氧

　　中图分类号： Q256,S859.83　　　　文献标识码： A　　　　文章编号: 1004－616X(2010)05－0361－05

　　【ABSTRACT】 OBJECTIVE: To investigate the effect of olaquindox on the antioxidant system in human hepatoma G2(HepG2) cells. METHODS: HepG2 cells were treated with 0, 200, 400 and 800 μg/ml olaquindox in 24 h. The activities of superoxide dismutase(SOD) and catalase(CAT), the level of malondialdehyde(MDA), the activities of glutathione (GSH) and glutathione peroxidase (GSH_PX), Na＋K＋_ATPase and Ca2＋Mg2＋－ATPase were measured. SOD or CAT, and the combination of SOD＋CAT were incubated for 3 h with olaquindox_treated HepG2 cells. The levels of reactive oxygen species (ROS) were evaluated by 2, 7_dichlorodihydrofluorescein diacetate(DCFDA). RESULTS: Olaquindox decreased the levels of T_ATPase, Na＋K＋－ATPase and Ca2＋Mg2＋－ATPase, SOD,GSH ,GSH_PX, in HepG2 cells(P<0.05 or P<0.01), with a dose_response relationship. After HepG2 cells were treated with olaquindox, the activity of CAT was decreased when compared with the control(P<0.01). Olaquindox led to a dose_dependent increase in the level of MDA(P<0.05 or P<0.01). While HepG2 cells were treated with olaquindox (800 μg/ml), CAT,SOD and SOD＋CAT reduced ROS about 80％ ,40％and 95％, respectively(P<0.01). CONCLUSION: Olaquindox disrupted the antioxidant system in HepG2 cells. Our results indicated that olaquindox_induced HepG2 cells predominantly generated H2O2, which could be scavenged by CAT.

　　【KEY WORDS】 olaquindox; superoxide dismutase; catalase; glutathione; ATPase; reactive oxygen species

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收稿日期： 2010－03－25； 修订日期： 2010－05－13

基金项目： 长江学者和创新团队发展计划 (IRT0866)

作者简介： 张　婷 (1984－　)，女，山西交城人，硕士，研究方向：分子与细胞毒理学。