临床检验杂志 , Chinese Journal of Clinical Laboratory Science,
编辑部邮箱 , 2011年06期
【作者】 王仕钦； 李芳秋； 史利宁； 孔小祥； 陆静芬；

【Author】 WANG Shi-qin,LI Fang-qiu,SHI Li-ning,KONG Xiao-xiang,LU Jing-fen(Institute of Medical Laboratory Sciences of PLA,Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command,PLA,Nanjing 210002,Jiangsu,China)

【机构】 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所；

【摘要】 目的制备白念珠菌烯醇化酶N端基因重组肽段ENO1-319P并检测其抗原性。方法选择与人烯醇化酶蛋白α-ENO同源性低的白念珠菌烯醇化酶肽段ENO1-319P,将其编码DNA序列克隆到表达载体pET28a(+),并在大肠埃希菌BL21(DE3)中用IPTG诱导带有His标签的重组肽段的表达。用SDS-PAGE电泳分析,TALON金属亲和层析柱纯化重组蛋白,其抗原性用侵袭性白念珠菌感染(ICAI)患者血清进行western blot评估。结果成功表达并纯化了目的肽段,该蛋白可与ICAI患者血清发生特异性反应。结论获得了白念珠菌烯醇化酶N端肽段ENO1-319P的基因表达工程菌株,为将此重组肽段用于制备特异性更高的抗体打下基础。 更多还原

【Abstract】 Objective To prepare the recombinant N-terminal fragment ENO1-319P of Candida albicans enolase and evaluate its antigenicity.Methods The DNA fragment encoding ENO1-319P,which showed low homology to the α-ENO1 of Homo sapiens enolase,was cloned into the prokaryotic expression vector pET28a(+).The recombinant peptide with His6 tag was then produced by the induction of IPTG in E.coli.BL21(DE3),purified by TALON metal affinity resins,and analyzed with SDS-PAGE.The immunogenicity of the recombinant p... 更多还原
【关键词】 白念珠菌； 烯醇化酶； N端肽段； 原核表达；
【Key words】 Candida albicans； enolase； N-terminal fragment； prokaryotic expression；
【基金】 江苏省科技支撑计划-社会发展项目(BE2009673)【分类号】R346

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