基因突变对RUNX2蛋白亚细胞定位的影响 Effect of the RUNX2 Gene Mutations on Subnuclear Localization of the RUNX2 Protein Mutants推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。 【作者】 梁国健; 谢宝仪; 轩东英;
【Author】 LIANG Guo-jian1,XIE Bao-yi,XUAN Dong-ying.1Stomatological Department of People’s Hospital in Yangjiang City,Yangjiang 529500,China
【机构】 阳江市人民医院口腔科; 广东省口腔医院; 南方医科大学附属口腔医院;
【摘要】 目的拟建立包含基因突变位点的真核表达载体,通过细胞转染了解RUNX2突变体亚细胞定位的改变。方法从患者全血中提取总RNA,通过反转录酶-聚合酶链反应获得目的片段,定向克隆获得包含基因突变位点及野生型位点的pEGFP-C1-RUNX2真核表达载体,通过瞬时转染NIH3T3成纤维细胞,显微镜下观察突变蛋白的亚细胞定位变化。结果成功构建包含突变位点及野生位点的真核表达载体pEGFP-C1-RUNX2,转染细胞24 h后,在荧光显微镜下观察转染细胞内的荧光蛋白表达情况,转染野生型RUNX2基因的细胞仅在胞核内表达绿色荧光,胞浆内无绿色荧光表达;分别引入突变位点c.674 G>A及c.673 C>T的表达载体转染的两组细胞,在胞浆胞核内均表达绿色荧光。结论不同的突变位点可以造成RUNX2蛋白亚细胞定位的改变,蛋白在核内累计表达量不足可能是造成单倍体不足的原因之一。 更多还原
【Abstract】 Objective To observe the effect of the RUNX2 gene mutations on subnuclear localization of the RUNX2 mutant protein by transfection.Methods Total RNA was extracted and reverse-transcribed from blood of a patient with cleidocranial dysplasia,and the eukaryotic expression vector pEGFP-C1-RUNX2 was constructed by subcloning the objective fragments.The subnuclear localization of RUNX2 wild and mutant protein was observed by transfected into NIH3T3 fibroblast cells.Results The vector pEGFP-C1-RUNX2 wa... 更多还原
【关键词】 RUNX2基因; 突变; 亚细胞定位; 颅骨锁骨发育不良; 【Key words】 RUNX2 gene; Mutation; Subnuclear localization; Cleidocranial dysplasia;
【基金】 广东省自然科学基金博士启动课题资助(9451026003003833);;高等学校博士学科点专项科研基金(20100101120114)
【文献出处】 广东牙病防治, Journal of Dental Prevention and Treatment, 编辑部邮箱 , 2011年02期
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