携带变形链球菌表面蛋白、葡聚糖结合蛋白及信号肽基因的真核表达质粒的构建 Construction and Identification of Recombinant Anticaries DNA Vaccine with Signal Tide,Surface Protein and Glucan-binding Protein Antigen Genes of Streptococcus Mutans推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。 【作者】 柴巧学; 刘建国; 杨德琴;
【Author】 CHAI Qiao-xue1,LIU Jian-guo,YANG De-qin.1Panyu Branch,Guangdong Provincial Stomatological Hospital & the Affiliated Stomatological Hospital of Southern Medical University,Guangzhou 511400,Chin
【机构】 广东省口腔医院·南方医科大学附属口腔医院番禺分院; 遵义医学院;
【摘要】 目的通过构建带有变形链球菌表面蛋白SpaP的P区、葡聚糖结合蛋白A葡聚糖结合区(glucan bind-ing domain,GBD)及一段信号肽基因的嵌和体真核表达质粒pSSG,为基因疫苗的制备提供实验基础。方法通过PCR扩增,获得分别编码SpaP的P区和GBD的两个基因片段sp和gg,以及人白介素2信号肽基因(signal)。将它们分别定向插入pMD20-T克隆载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆,初步鉴定后测序。将获得的3个基因片段分别双酶切,胶回收纯化后将同样进行双酶切的pVAX1质粒在T4 DNA连接酶作用下进行连接反应,获得真核表达质粒pSSG,并转化DH5α,提取纯化pSSG,进行质粒RCR,酶切电泳鉴定并测序。结果真核表达质粒pSSG构建正确,目的基因sp、gg和signal定向插入至真核表达载体。结论真核表达质粒pSSG包含了SpaP的P区和GBD以及人白介素2信号肽的编码基因,为基因疫苗研究奠定基础。 更多还原
【Abstract】 Objective This study is aimed to clone the gene encoding GbpA functional area(glucan-binding domain,GBD) and P region of SpaP,together with a signal sequence into the eukaryotic expression vector pVAX1 and to construct an eukaryotic expression plasmid called pSSG used as anti-caries DNA vaccine.Methods By the method of PCR,the gene fragment named gg encoding GbpA functional area(GBD) and sp encoding P region of SpaP of Streptococcus mutans UA159 were amplified.And then,a length of human Interleu... 更多还原
【关键词】 变形链球菌; 表面蛋白抗原; 葡聚糖结合蛋白; 真核表达质粒; 基因疫苗; 【Key words】 Streptococcus mutans; Surface protein antigen; Glucan-binding protein; Eukaryotic expression vector; Gene vaccine;
【基金】 贵州省教育厅重点资助项目(黔教科2004119)
【文献出处】 广东牙病防治, Journal of Dental Prevention and Treatment, 编辑部邮箱 , 2011年04期 【DOI】CNKI:SUN:GDYB.0.2011-04-004 【分类号】R781.1 【参考文献】 [1] 刘红军; 潘善培; 谢琪璇; 肖銮娟; 董鲁; 卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的构建及其在体外的表达[J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版) 2003年01期 [2] 岳松龄; 微生物与龋病(二) 龋病学研究百年回顾与展望之二[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2006年03期 【相似文献】 [1] 郭丽宏; 刘天佳; 曹福贤; 变形链球菌表面蛋白真核表达质粒pcDNA3/pacA及pcDNA3/pacP免疫动物实验研究[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2001年05期 [2] 郭丽宏!610041; 刘天佳!610041; 陈舟!610041; 变形链球菌表面蛋白pcDNA3/pacA与pcDNA3/pacP真核表达质粒的构建[J]. 华西口腔医学杂志 2000年06期 [3] 郭丽宏!610041; 刘天佳!610041; 杨锦波!610041; 变形链球菌表面蛋白真核表达质粒pcDNA3/pacA和pcDNA3/pacP在哺乳动物细胞中的表达[J]. 华西口腔医学杂志 2000年06期 [4] 谢佐理; 岳松龄; 变形链球菌185-SA表面蛋白抗原的提取与鉴定[J]. 广东牙病防治 1999年01期 [5] 刘天佳; 杨锦波; 刘建国; 贾文祥; 郭丽宏; 杨德琴; 新型防龋疫苗——变形链球菌基因疫苗防龋应用基础研究[J]. 医学研究杂志 2007年02期 [6] 曹福娴; 刘天佳; 杨德琴; 变形链球菌重组质粒作为防龋基因疫苗安全性的研究[J]. 河南医药信息 2002年10期 [7] 刘建国; 樊明文; 边专; 凌均启; 汪喻忠; 吴红昆; 乳清抗体对变形链球菌粘附能力的影响[J]. 广东牙病防治 1997年03期 [8] 杨德琴; 刘天佳; 曹福娴; 杨锦波; 刘建国; 变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗对唾液变形链球菌和牙菌斑的影响[J]. 四川大学学报(医学版) 2003年03期 [9] 苏凌云; 吴补领; 李福洋; 陆群; 变形链球菌葡聚糖结合蛋白A真核表达质粒pcDNA3.1/GBD在哺乳动物细胞中的表达[J]. 华西口腔医学杂志 2004年01期 [10] 孙汉堂; 吴补领; 杨聚才; 孙叶芳; 变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因特异片段的分子克隆[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2000年03期
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