EGFR二聚化B细胞表位抗原肽基因克隆、表达与纯化 Cloning,expression and purification of B cell epitope antigen peptide of EGFR dimerization推荐 CAJ下载 PDF下载 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。
免疫学杂志 , Immunological Journal, 编辑部邮箱 , 2011年10期 【作者】 朱磊; 吴梅芝; 赵林; 黄绮玲; 梁梅; 李黄金;
【Author】 ZHU Lei,WU Meizhi,ZHAO Lin,HUANG Qiling,LIANG Mei,LI HuangjinDepartment of Biotechnology,School of Life Science and Biopharmaceutics,GuangDong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China
【机构】 广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系;
【摘要】 目的利用基因工程手段建立表皮生长因子受体(EGFR)二聚化B细胞表位抗原肽MVF-ER的高效制备方法。方法采用重叠延伸PCR扩增MVF-ER后克隆于表达载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,产物采用肠激酶酶切和镍离子螯合亲和层析法纯化。结果通过10对引物5步重叠延伸得到273 bp的扩增产物,目的基因与硫氧环蛋白(Trx)融合后可高效表达,经酶切和层析后得到纯度为95%的抗原肽。结论成功建立抗原肽"MVF-ER"的高效制备方法,为进一步研究EGFR过表达恶性肿瘤的治疗性疫苗打下了坚实基础。 更多还原
【Abstract】 We aim to establish a high performance preparation system for B cell epitope antigen peptide of EGFR dimerization for further research on therapeutic vaccine of EGFR over-expression tumors.The MVF-ER gene of 273 bp was amplified by splicing overlap extension PCR(SOE-PCR),then cloned into the vector of pET32a,and expressed in E.coli BL21(DE3) in the form of fusion with Trx.The expression product was purified by Ni+ affinity chromatography.The antigen peptide was recovered from the fusion protein ... 更多还原 【关键词】 表皮生长因子受体; 二聚化; B细胞表位; 抗原肽; 高效制备; 【Key words】 EGFR; Dimerization; B cell epitope; Antigen peptide; High performance preparation; 【基金】 广东省科技计划项目(2011B080701004)【分类号】R392.11
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